• product_banner

Monkeypox Virus Real Time PCR Kit

Rövid leírás:

Macska.Nem B001P-01 Méret 48 Tesztek/Kit
Mintadarab Szérum/lézió váladék Trans.& Sto.Temp. -25 ~-15 ℃
Formátum Az előkeveréket liofilizáltuk, és 8 csíkos PCR-csőben aliquot részekre osztották
Alkalmazható eszköz Valós idejű PCR eszközök, mint például az ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio és BTK-8

Termék leírás

Termékcímkék

Termék leírás

Rendeltetésszerű használat

A majomhimlő vírus kimutatására szolgál emberi szérum- vagy lézióváladék-mintákban valós idejű PCR-rendszerek segítségével.

Teszt elve

Ez a termék egy fluoreszcens szondán alapuló Taqman® valós idejű PCR vizsgálati rendszer.A majomhimlő vírus F3L génjének kimutatására speciális primereket és próbákat terveztek.A humán konzervált gént megcélzó belső kontroll figyeli a mintagyűjtést, a mintakezelést és a valós idejű PCR folyamatot, hogy elkerülje a hamis negatív eredményeket.A készlet egy teljesen premix liofilizált rendszer, amely tartalmazza a majomhimlő vírus kimutatásához szükséges anyagokat: nukleinsavamplifikációs enzimet, UDG enzimet, reakciópuffert, specifikus primert és szondát.

Fő tartalom

A megadott komponensek a táblázatban vannak felsorolva.

Alkatrészek

Csomag

Hozzávaló

Majomhimlő vírusLiofilizált premix 8 csíkos PCR cső× 6 tasak Primerek, próbák, dNTP/dUTP keverék, Mg2+, Taq DNS polimeráz, UDG enzim
MPV pozitív kontroll 400 μl × 1 cső Target gént tartalmazó DNS-szekvenciák
MPV negatív kontroll 400 μl × 1 cső Humán génszegmenst tartalmazó DNS-szekvenciák
Oldóoldat 1 ml × 1 cső Stabilizátor
Megfelelőségi tanúsítvány 1 darab

/

Flow művelet

1. MintaGyűjtemény:A mintát steril csövekbe kell gyűjteni ennek megfelelően

szabványos műszaki előírásokkal.

2. Reagens előkészítés (reagens előkészítési terület)

Vegye ki a készlet alkatrészeit, és szobahőmérsékleten egyensúlyozza ki őket készenléti használatra.

3. Mintafeldolgozás (mintafeldolgozási terület)

3.1 Nukleinsav extrakció

A nukleinsav extrakcióhoz 200 μL folyékony minták, pozitív kontroll és negatív kontroll vétele javasolt, a vírus DNS extrakciós kitekre vonatkozó követelményeknek és eljárásoknak megfelelően.

3.2 Liofilizált por feloldása és sablon hozzáadása

Készítsen Monkeypox Virus liofilizált premixet a minták számának megfelelően.Egy mintához egy liofilizált premix port tartalmazó PCR cső szükséges.A negatív és a pozitív kontrollt két mintaként kell kezelni.

(1) Adjon 15 μL feloldó oldatot minden liofilizált premixet tartalmazó PCR-csőbe, majd adjon 5 μL extrahált mintát/negatív kontrollt/pozitív kontrollt mindegyik PCR-csőbe.

(2) Fedje le szorosan a PCR-csöveket, pöccintse meg kézzel a PCR-csöveket, amíg a liofilizált por teljesen fel nem oldódik és összekeveredett, majd azonnali kis sebességű centrifugálással gyűjtse össze a folyadékot a PCR-csövek aljára.

(3) Ha általános valós idejű PCR-műszert használ a kimutatáshoz, akkor közvetlenül vigye át a PCR csöveket az amplifikációs területre;Ha a detektáláshoz BTK-8-at használ, akkor a következő műveleteket kell végrehajtania: 10 μL folyadékot vigyen át a PCR csőből a BTK-8 reakcióchip üregébe.Egy PCR-cső a chipen lévő egy lyuknak felel meg.A pipettázás során ügyeljen arra, hogy a pipetta függőlegesen 90 fokkal álljon.Az aeroszolzáró pipettahegyeket mérsékelt erővel kell a mélyedés közepére helyezni, és abba kell hagyni a pipetta nyomását, amikor eléri az első fokozatot (a buborékok elkerülése érdekében).A lyukak feltöltése után vegyen ki egy reakcióchip membránt, hogy az összes lyukat befedje, majd a chipet átvisszük az amplifikáció detektálási területére.

4. PCR-amplifikáció (kimutatási terület)

4.1 Helyezze a PCR csöveket/reakcióchipet a reakciótartályba, és állítsa be az egyes reakciólyukak nevét a megfelelő sorrendben.

4.2 A kimutatási fluoreszcencia beállításai: (1) Monkeypox virus (FAM);(2) Belső ellenőrzés (CY5).

4.3 Futtassa a következő kerékpározási protokollt

ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio protokoll:

Lépések

Hőfok

Idő

Ciklusok

1

Elődenaturáció

95℃

2 perc

1

2

Denaturáció

95℃

10 s

45

Lágyítás, nyújtás, fluoreszcencia felvétel

60℃

30 s

 A BTK-8 protokollja:

Lépések

Hőfok

Idő

Ciklusok

1

Elődenaturáció

95℃

2 perc

1

2

Denaturáció

95℃

5 s

45

Lágyítás, nyújtás, fluoreszcencia felvétel

60℃

14 s

5. Az eredmények elemzése (lásd a műszer használati útmutatóját)

A reakció után az eredmények automatikusan mentésre kerülnek.Kattintson az „Elemzés” elemre az elemzéshez, és a műszer automatikusan értelmezi minden egyes minta Ct értékét az eredmény oszlopban.A negatív és pozitív kontrolleredményeknek meg kell felelniük a következő "6. Minőségellenőrzés" pontnak.

6. Minőség ellenőrzés

6.1 Negatív kontroll: Nincs Ct vagy Ct>40 a FAM csatornában, Ct≤40 a CY5 csatornában normál erősítési görbével.

6.2 Pozitív kontroll: Ct≤35 a FAM csatornában normál erősítési görbével, Ct≤40 a CY5 csatornában normál erősítési görbével.

6.3 Az eredmény akkor érvényes, ha a fenti kritériumok mindegyike teljesül.Ellenkező esetben az eredmény érvénytelen.

Eredmény értelmezése

A következő eredmények lehetségesek:

  FAM csatorna Ct értéke A CY5 csatorna Ct értéke Értelmezés

1#

Nincs Ct vagy Ct>40

≤40

Monkeypox vírus negatív

2#

≤40

Bármilyen eredmény

Monkeypox vírus pozitív

3#

40-45

≤40

Újrateszt;ha még mindig 40-45, jelentse 1#-ként

4#

Nincs Ct vagy Ct>40

Nincs Ct vagy Ct>40

Érvénytelen

JEGYZET: Ha érvénytelen eredmény adódik, a mintát össze kell gyűjteni és újra meg kell vizsgálni.

Rendelési információ

termék név Macska.Nem Méret Mintadarab Szavatossági idő Trans.& Sto.Temp.
Monkeypox Virus Real Time PCR Kit B001P-01 48 teszt/készlet Szérum/lézió váladék 12 hónap -25 ~-15 ℃

  • Előző:
  • Következő:

  • Írja ide üzenetét és küldje el nekünk